非免疫缺陷相关性B细胞淋巴瘤与EB病毒的相关性研究

甘肃省张掖地区 罗荣 郭小红

　EB病毒是一种疱疹型DNA病毒，除与Burkitt淋巴瘤，鼻咽部T/NK细胞淋巴瘤，器官移植后B细胞淋巴瘤，AIDS相关性淋巴瘤有密切关系外，还与霍奇金病，外周T细胞淋巴瘤等有关。为了了解EB病毒是否与我国北方人非免疫缺陷相关性淋巴结内B细胞淋巴瘤进行EB病毒的检测，旨在探讨EB病毒与我国北方人结内B细胞淋巴瘤的相关性。
　　1 材料与方法
　　1．1 材料
　　40例结内B细胞淋巴瘤病例选自北京医科大学病理系外检档案及甘肃省张掖地区医院病理科外检档案。所有病例均为当地生活20a以上，或为当地出生者。男性24例，女性16例。男女之比为3：2，年龄14岁~75岁，平均49.2岁。
　　1．2方法
　　所有标本经10%福马林固定，石蜡包理及HE染色，免疫组织化学：单克隆抗体UCHL-1（CD45RO）、L26（CD20）、KP-1（CD68）、EMA、LCA、S-100均DAKO公司产品。采用链菌素亲生物素蛋白-过氧化酶（LSAB）法分别检测肿瘤细胞表达情况。UCHL-1及L126标准免疫组化方法，一抗4C过夜。71例非霍奇金淋巴瘤中40例确定为B细胞性淋巴瘤，并按Kiel分类进行分型。原位杂交：探针选用EB病毒编码的小mRNA(EBERs，香港大学惠赠)。主要步骤：（1）石蜡切片脱蜡到水；（2）0.1NHCL;(3)蛋白酶K消化;(4)冷乙醇脱水;(5)加入杂交混合液(6)地高辛底物缓冲液洗;(7)滴加抗地高辛单克隆抗体;(8)地高辛底物缓冲液洗;(9)滴加稀释的BCIP/NBT显色;(10)甲基绿复染.

　　阳性对照用已知EB病毒阳性的鼻咽T细胞淋巴瘤病例.
　　2 结果
　　2.1免疫表型及组织学分型
　　71例非霍奇金淋巴瘤中,40例肿瘤细胞显示L26阳性,UCHL-1阴性,证实为B细胞淋巴瘤.瘤细胞核膜厚,染色质呈块状,靠近核膜.细胞质嗜酸性或嗜双色性.部分瘤细胞形成滤泡样结构,瘤组织内血管增生不明显,未见有组织细胞反应及血管浸润现象.按照Kiel分类法进行分型,低度恶性20例,包括中心母细胞-中心细胞性13例,中心细胞性3例,淋巴细胞性4例.高度恶性20例,包括中心母细胞性17例,免疫母细胞性2例,Burkitt样1例.
　　2.2 EB病毒检测
　　EBERs原位杂交40例中3例阳性,阳性信号们于肿瘤细胞核内,呈深蓝紫色,分布于30%~60%瘤细胞内,其中低恶性1例占33.3%,高度恶性2例占66.6%.
　　3 讨论
　　EBERs是EB病毒潜伏感染细胞中最丰富的基因转录产物,拷贝数高达107/细胞,所以EBERs原位杂交具有很高的敏感性.且EBERs-HIS可以明确定位于瘤细胞内,EB病毒具有亲B细胞的特性,经观察发现EB病毒具有亲B细胞的特性,经观察发现EB病毒与先天/后天免疫缺陷的相关高度恶性B细胞淋巴瘤有关,EB病毒检出率为83%~100%.然而至今仅有少数证据显示EB病毒与非免疫缺陷相关B细胞淋巴瘤有关系.周小鸽等报道的127例非免疫缺陷性B细胞淋巴瘤中只有8例EB病毒阳性.同样,欧美病人的检出率也只在5%左右.我国是EB病毒感染的严重地区,鼻咽部T/NK细胞淋巴瘤中EBERs检出率高达89%,霍奇病中EBERs检出率也达44%.本组对40例淋巴结内非免疫缺陷相关B细胞淋巴瘤进行了EB病毒相关性研究,发现3例EBERs阳性.高度恶性2例,低度恶性1例,此结果显示我国北方人淋巴结内非免疫缺陷相关性B细胞淋巴瘤对EB病毒的感染率较低,与国内,国外一些学者的研究结果基本一致.
　　研究结果提示,淋巴结内非免疫缺陷相关性B细胞淋巴瘤可能与EB病毒感染有关,但不是主要致病因素,并且与恶性无明显关系.

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